实验动物镇静、止痛、麻醉指南

1. 目的：规范实验动物镇静剂、麻醉剂和止痛剂的使用。

2. 适用范围：
  本SOP适用于在本校开展动物麻醉的所有实验人员，由于国内部分药品归属管制类，本指南仅供参考使用。

3. 职责：

  实验人员应在开展实验前通过本实验的伦理申批。

  伦理委员会评价该试验涉及到的内容是否符合国内外相关规定。

  项目负责人及兽医监督实际实验过程中具体操作是否按照申请说明进行。

4.1 术语：

  实验动物镇静：利用药物对动物进行保定同时减轻动物因疼痛而致的恐惧、紧张和不安情绪。
  麻醉：利用物理或化学的方法，造成动物的中枢和（或）周围神经系统的可逆性功能抑制，动物全身或局部的感觉特别是痛觉暂时消失。

  止痛：利用药物缓解动物苏醒后因实验造成的各种疼痛。

  给药方式：IP----腹腔注射；SC----皮下注射；IM----肌肉注射；IV----静脉注射；PO----口服。

4.2 麻醉的程序：

4.2.1 麻醉前给药

麻醉前应认真检查所用的麻醉/止痛剂的有效使用日期，不可使用过期药物。试验动物麻醉前给药目通常为镇静、保定，以降低动物焦虑。同时给予阿托品类药物，抑制麻醉过程中动物唾液的分泌，减少动物窒息风险。

4.2.2 麻醉剂给予

根据实验目的、动物种类、手术时长、动物苏醒后的疼痛管理要求和动物伦理要求等，选择合适的麻醉剂和给药方式。麻醉期间应注意对动物采取适当的保温措施，如电热毯或红外线加热灯，防止动物体温降低。

4.2.3 麻醉后止痛

实验动物苏醒后，因手术创口、炎症反应等，不可避免会产生疼痛感。应给予止痛剂，并给予抗生素消炎，帮助实验动物减少术后疼痛。

4.3 麻醉深度的判断：

4.3.1 诱导期

动物存在主动动作，呼吸和心率增加，步态不稳，躯干后部摇晃，后肢麻痹无力。

4.3.2 浅外科期

动物停止运动，呈侧卧或角弓反张状态，置于仰卧后不能翻正。对疼痛刺激以外的刺激无反应或反应不敏感，捏夹皮肤或刺激脚趾仍有收缩反射。以胸式呼吸为主，出现中等程度的肌肉松弛，眼睑和角膜反射存在。

4.3.3 深外科期

呼吸频率下降，呼吸方式以腹式呼吸为主，肌肉完全松弛，眼睑反应消失、角膜反射微弱，钳夹脚趾或指间无反应。

4.3.4 脱离深外科期

动物四肢震颤、抽搐，全身肌肉开始收缩，由平坦仰卧状转为侧卧蜷缩状。

4.4 应急处理预案准备：

如果由于过量麻醉导致麻醉程度过深，应及时对实验动物采取复苏和抢救措施。如发生呼吸频率低于40次/min或体温过低，应立即停止吸入麻醉药的输送，调整体位，确保动物呼吸顺畅，也可给与物理刺激，捏小鼠的尾巴，脚趾等方式，心跳停止的需按压胸部做心肺复苏，同时使用保温垫等措施保持动物体温在正常范围。

4.5 常用镇静、麻醉、止痛药物的选择

4.5.1 小鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择

4.5.2 小鼠注射麻醉药物的选择

4.5.3 小鼠吸入麻醉药物选择

注：异氟烷的使用需要需要特制挥发罐，面罩等。

4.5.4 小鼠止痛药物选择

4.5.5 大鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择

4.5.6 大鼠麻醉药物的选择

4.5.7 大鼠止痛药物的选择

4.5.8 局部麻醉药物选择

局部麻醉能局部阻断神经传导，而不破坏神经组织。实验中使用的局部麻醉药有酯类和酰胺类。酯类局麻药包括普鲁卡因、氯鲁卡因等，酯类局麻在血浆中水解，其代谢产物对氨基苯甲酸可引起过敏反应；酯胺类局麻药有利多卡因、布比卡因等，酯胺类局麻药在肝脏内水解。

（1）普鲁卡因：短效局麻药，起效时间1-3分钟，时效约50分钟。

（2）利多卡因：中效局麻药，推荐浸润浓度为0.5%-2%，小鼠最大剂量为17.5mg/kg，起效时间1-5分钟，时效1-1.5小时。扩散和穿透力较强。

4.6 麻醉及术后的护理

4.6.1   在麻醉过程中，如果脏器长时间暴露，应适当滴加温性的生理盐水，防止粘膜发干；眼部周围可以涂抹润滑的眼膏，减少由于眼部干燥引发的术后不适。

4.6.2 腹腔注射确保针头位置正确，若麻药进入胃肠道则会引起胃肠道麻痹胀气，动物难以进入麻醉状态，严重致死。

4.6.3    实验动物在麻醉期体温容易下降，麻醉和苏醒期应注意对动物进行保温。在寒冷冬季做慢性实验时，麻醉剂在注射前要加热至动物体温水平。

4.6.4   麻醉结束后不可与未麻醉的动物放在一起，防止恢复期动物受伤。恢复期必须保温。若术部的牵拉会阻碍小鼠术后初期的饮水，应当在小鼠的笼内底部放置无菌的果冻及饲料供其采食。当动物恢复正常活动时，可以与其它动物放回同一笼或一个动物房间。随后几天必须定时对动物进行观察保证不出现并发症，如果发生术部开线，感染及发生疼痛异常等症状应按照兽医的指导进行操作。